पुन: संयोजक स्पाइक प्रोटीनमा आधारित पोर्सिन एक्यूट डायरिया सिन्ड्रोम कोरोनाभाइरस IgG एन्टिबडी पत्ता लगाउन अप्रत्यक्ष एलिसा विधिको विकास

पोर्साइन एक्युट डायरिया सिन्ड्रोम कोरोनाभाइरस (SADS-CoV) नयाँ पत्ता लागेको पोर्सिन इन्टरिक रोगजनक कोरोनाभाइरस हो जसले नवजात सुँगुरहरूमा पानीको पखाला निम्त्याउन सक्छ र सुँगुर उद्योगलाई महत्त्वपूर्ण आर्थिक नोक्सान पुर्‍याउन सक्छ।वर्तमानमा, SADS-CoV संक्रमण र खोपको प्रभावकारिता मूल्याङ्कन गर्न कुनै उपयुक्त सेरोलोजिकल विधि छैन, त्यसैले यो कमीलाई पूरा गर्न प्रभावकारी इन्जाइम-लिङ्क्ड इम्युनोसोर्बेन्ट एसे (ELISA) प्रयोग गर्न जरुरी छ।यहाँ, मानव IgG Fc डोमेनसँग फ्युज गरिएको SADS-CoV स्पाइक (S) प्रोटीन अभिव्यक्त गर्ने पुनः संयोजक ब्याकुलोभाइरस उत्पादन गर्न निर्माण गरिएको थियो र HEK 293F कोषहरूमा व्यक्त गरिएको थियो।S-Fc प्रोटिनलाई प्रोटिन G रालले शुद्ध गरिन्छ र मानव विरोधी Fc र एन्टि-SADS-CoV एन्टिबडीहरूसँग प्रतिक्रियाशीलता कायम राख्छ।त्यसपछि S-Fc प्रोटीन अप्रत्यक्ष ELISA (S-iELISA) को विकास गर्न र S-iELISA को प्रतिक्रिया अवस्थाहरू अनुकूलन गर्न प्रयोग गरियो।नतिजाको रूपमा, इम्युनोफ्लोरेसेन्स एसे (IFA) र वेस्टर्न ब्लटिंग द्वारा पुष्टि गरिएको 40 SADS-CoV नेगेटिभ सेराको OD450nm मानको विश्लेषण गरेर, कट-अफ मान ०.३७११ हुने निर्धारण गरिएको थियो।S-iELISA को रन भित्र र बीच 6 SADS-CoV सकारात्मक sera को भिन्नता को गुणांक (CV) सबै 10% भन्दा कम थियो।क्रस-रिएक्टिभिटी परीक्षणले देखायो कि S-iELISA को अन्य पोर्सिन भाइरस सेरासँग कुनै क्रस-रिएक्टिभिटी छैन।थप रूपमा, 111 क्लिनिकल सीरम नमूनाहरूको पहिचानको आधारमा, IFA र S-iELISA को समग्र संयोग दर 97.3% थियो।सीरमको 7 विभिन्न OD450nm मानहरूसँग गरिएको भाइरस तटस्थीकरण परीक्षणले देखायो कि S-iELISA द्वारा पत्ता लागेको OD450nm मान भाइरस तटस्थीकरण परीक्षणसँग सकारात्मक रूपमा सम्बन्धित थियो।अन्तमा, S-iELISA 300 सुँगुर फार्म सीरम नमूनाहरूमा प्रदर्शन गरिएको थियो।अन्य पोर्सिन एन्टरोभाइरसहरूको व्यावसायिक किटहरूले SADS-CoV, TGEV, PDCoV र PEDV को IgG सकारात्मक दर क्रमशः 81.7%, 54%, र 65.3% देखाएको छ।6%, क्रमशः।परिणामहरूले देखाउँछन् कि S-iELISA विशिष्ट, संवेदनशील र पुन: उत्पादन योग्य छ, र सुँगुर उद्योगमा SADS-CoV संक्रमण पत्ता लगाउन प्रयोग गर्न सकिन्छ।यो लेख प्रतिलिपि अधिकार द्वारा सुरक्षित छ।सबै अधिकार सुरक्षित।


पोस्ट समय: जुन-22-2021